一、产品介绍

通用名称：呼吸道病原菌核酸检测试剂盒（恒温扩增芯片法）

英文名称：Respiratory Pathogens Nucleic Acid Detection Kit (Isothermal Ampilification on Disk Chip)

一、用途

本试剂盒可定性检测痰液中 13种临床常见下呼吸道病原菌，包括：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希氏菌、嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、结核分枝杆菌复合群。

本试剂盒适用于常见的下呼吸道感染疾病的辅助诊断。样品类型是从疑似下呼吸道感染的患者痰液提取的核酸。

二、技术机理

呼吸道病原菌核酸检测试剂盒（恒温扩增芯片法）是采用恒温扩增技术，利用具有链置换功能的聚合酶在恒温（65℃）条件下进行反应，利用荧光染料掺入法进行实时荧光检测，扩增阳性的样品会产生类似实时荧光恒温的“S”形扩增曲线，一步完成对靶基因的扩增和检测。

将该方法与微流体芯片技术相结合，可同时对多种核酸靶序列进行高通量并行检测。图1为所用碟式芯片的结构，每张碟式芯片上设有24个反应池（结构详见图1，反应池逆时针依次编号，其中进出样口1对应的为1号反应池），可在特定的反应池包埋固定一套引物用于一种核酸靶序列的扩增与检测。将样品DNA与扩增试剂混合后注入芯片，并通过离心分配至各个反应池，在芯片的各个反应池中同时进行独立的恒温扩增反应并进行实时荧光检测，若检测到某反应池出现“S”形扩增曲线，则该反应池对应的检测指标为阳性。

一、临床意义和社会价值

恒温扩增微流控芯片核酸检测技术是病原体核酸快速检测新方法,2小时内完成多个指标的快速检测，比传统培养法快6～240倍,从很大程度上解决了临床病原菌难培养、检测周期长、诊断率低等亟待解决的问题。世界卫生组织2013年发布最新的统计结果，世界十大死因中下呼吸道感染（5.9%）位列第三位。肺炎作为全球传染性疾病最主要的死因之一，更是儿童死亡的第一病因。中国疾病预防控制中心2011年系统分析显示中国大陆肺炎死亡率为184/10万～1 223/10万人口。目前儿童肺炎发病率较高，5岁以下儿童肺炎发病率为0.06-0.27次/人年。

下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。近年，血清学和分子生物学研究的进展，使人们对细菌、支原体、衣原体感染或军团菌感染的认识有很大提高。先进的检测技术来提高病原菌鉴定的准确性，缩短检测时间，降低医疗检测成本，提高操作使用的便捷性和人性化，适合各级医疗单位推广应用。

本项技术可同时一次性快速检出13种常见下呼吸道病原菌，是细菌性肺炎快速检测新方法。从很大程度上解决了下呼吸道感染病原菌难培养、检测周期长、诊断率低等亟待解决的问题。

二、产品特点

本项技术可同时一次性快速检出13种常见下呼吸道病原菌，是细菌性肺炎快速检测新方法。从很大程度上解决了下呼吸道感染病原菌难培养、检测周期长、诊断率低等亟待解决的问题。

l 技术先进：直接检测样本的DNA，能早期判断13种常见病原菌；

l 操作简便：核酸提取后的全部反应都在全自动化仪器中进行；

l 检测快速：采用先进的LAMP恒温扩增技术，全过程仅需2小时内，即可完成13个专项指标的快速检测（全过程包括DNA提取加扩增检测），比传统培养法快6~240倍；

l 灵敏度高：最低检出线为500个拷贝/反应；

l 特异性强：专利碟式芯片技术，对照反应池设计、有效防污染体系能保护实验室；

l 自动判读：仪器自带软件，自动根据检测结果绘出曲线、判读结果；

目前，传统病原学诊断方法包括：呼吸道标本涂片染色及培养，血清学抗体检查等。痰培养具有自身的局限性：痰标本合格率低；培养阳性率低；如果在应用抗生素之后再做培养，阳性率更低；培养周期长（3天-2个月）；样本易污染，准确性低；有些病原体难培养；血清学抗体检查受方法学限制（人体针对病原产生IgM抗体平均需要2-3周），不适于做早期病原学诊断。

与传统的细菌培养等检测手段相比，分子诊断技术具有安全、灵敏、特异、高效、快速等优势，必将在感染疾病病原学诊断方面发挥越来越重要的作用。随着经济水平的提高和科技的不断发展，分子生物学技术在临床中的转化应用将逐渐成为临床病原学诊断的主要手段，为临床治疗提供指导，同时也将大大降低医疗费用，减轻社会的经济负担。